高效毛细管电泳仪常见问题解决方案冰染染料

高效毛细管电泳仪常见问题解决方案

高效毛细管电泳仪常见问题解决方案：一、无电泳峰：1、检查结果：没有电流。可能原因：毛细管堵塞或断裂。解决方案：用水冲洗毛细管，观察是否有水流出。若无水流出，拆下卡盒检查毛细管两端和窗口是否断裂。若毛细管没断裂，可用水反向高压冲洗。缓冲液需过滤，将样品过滤或离心去除其中的颗粒。2、检查结果：电流波动很大，甚至几乎消失。可能原因：缓冲液中有气泡产生或区带中样品析出。解决方案：将缓冲液超声脱气，如果还有此现象发生，则可能是区带中样品析出，可降低样品浓度。对于在缓冲液中溶解度不高的样品，需在缓冲液中加入添加剂。3、检查结果：电流初始值较小，后逐渐增大。可能原因：样品进样量过大。解决方案：减少进样量。4、检查结果：电流正常。可能原因：样品浓度过低。解决方案：使用高浓度样品测试，如果无法解决则有可能是以下其它原因。5、检查结果：电流正常。可能原因：检测波长设置不正确。解决方案：确认被分析物的特征吸收，检查检测波长设置。6、检查结果：电流正常。可能原因：分离极性错误。解决方案：对于蛋白质样品，注意蛋白质在分离条件下其PI和所带电荷。对于核酸样品，通常条件下会带负电荷。7、检查结果：电流正常。可能原因：样品在毛细管内壁吸附。解决方案：对于蛋白质和核酸样品，应尽量采用涂层毛细管、极端pH条件或动态涂层，防止样品吸附。8、检查结果：电流正常。可能原因：光学检测器或光纤损坏。解决方案：进行标准样品测试，如果没有对应结果出现，则可能存在硬件问题。二、电泳峰拖尾：1、可能原因：毛细管窗口未开或窗口位置不正。解决方案：打开毛细管检测窗口或调整窗口位置。2、可能原因：样品在毛细管内壁吸附。解决方案：对于蛋白质和核酸样品，应尽量采用涂层毛细管、极端pH 条件或动态涂层，防止样品吸附。三、电泳峰不对称：1、可能原因：毛细管入口切口不平齐。解决方案：重新切割毛细管入口。2、可能原因：缓冲溶液与样品溶液电解率差别过大。解决方案：采用缓冲液作为样品溶剂。四、电泳峰过宽：1、检查结果：降低样品进样量，有改善。可能原因：样品浓度太大。解决方案：可降低样品浓度或减少进样量。2、检查结果：降低样品进样量，无改善。可能原因：样品本身性质不均一。解决方案：此原因主要是针对蛋白质样品，小分子样品发生的概率较低。五、迁移时间不稳定：1、检查结果：出峰时间不稳定且无规律。可能原因：缓冲液与毛细管内壁平衡较慢。解决方案：每次样品运行之间避免用NaOH冲洗毛细管。2、检查结果：出峰时间依次后延。可能原因：样品中物质易在毛细管内壁吸附。解决方案：首先在每次样品运行之前用0.1N NaOH溶液短时间冲洗毛细管，观察迁移时间能否重复。如果效果不佳，使用涂层毛细管或将样品再次处理。六、峰形和出峰时间不稳定：1、检查结果：更换缓冲液种类，峰形和出峰时间稳定。可能原因：缓冲液不稳定、易电解或样品在原缓冲液条件下不稳定。解决方案：更换其它种类的缓冲液。2、检查结果：更换缓冲液种类，峰形和出峰时间仍不稳定。可能原因：样品中物质易在毛细管内壁吸附。解决方案：采用涂层毛细管或对样品进行前处理。七、电流泄漏：1、检查结果：毛细管断裂。可能原因：毛细管内缓冲液流出，造成电流泄漏。解决方案：更换毛细管，并用水清洗光纤头和检测窗口。2、检查结果：毛细管无断裂。可能原因：实验环境湿度过大。解决方案：使用抽湿机或空调。湿度过大时，可在仪器关闭时放置干燥剂，但仪器运行时一定要将干燥剂取出。八、无法加气压：1、检查结果：更换后问题解决。可能原因：瓶颈处有液体，导致瓶塞易滑。解决方案：向瓶中装液体时不要过满，也不要沾湿瓶颈。2、检查结果：若瓶塞无问题，可先采用真空方式，若真空方式可使用，但压力仍不可用。可能原因：压力系统存在问题。解决方案：检修。九、迁移时间可重复，但峰面积重复性不好：1、检查结果：重新切割毛细管入口，问题解决。可能原因：毛细管入口切口不平齐。解决方案：重新切割毛细管入口。2、检查结果：重新切割毛细管入口，问题仍然存在。可能原因：若电动进样可保持重现，则压力控制或气路存在问题。解决方案：检修。十、毛细管或电极易折断：1、可能原因：瓶盖老化。解决方案：换瓶盖。2、可能原因：电极不垂直。解决方案：将电极拉直。十一、冷却液泄漏：1、可能原因：卡盒内垫圈和卡子漏装或装错顺序。解决方案：严格按安装顺序安装。2、可能原因：仪器内部管路密封不严。解决方案：检修。

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